【【植物】植物茎尖培养】
植物茎尖培养1、外植体的选取及预处理
⑴外植体选取
选取生长健壮、已发芽、长势较好、无病害的生姜根状茎作为外植体 。
⑵材料预处理
取带芽的枝条或鳞茎球茎， 洗衣粉适量冲洗， 然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位（约1cm×1cm大小）， 顶芽和腋芽、大芽和小芽分开 。 继续用洗衣粉清洗10分钟， 清洗时需不停晃动 。 再用自来水冲洗干净， 置空培养瓶备用 。
2、超净工作台无菌操作准备
检查超净工作台， 是否已开机灭菌， 酒精灯、酒精瓶、升汞是否齐备、无菌水、培养瓶放置与位置、接种器械是否齐备与放置 。
3、外植体消毒
⑴蒸馏水冲洗
外植体置于已杀菌开机的超净工作台上， 新洁尔灭洗液消毒双手， 无菌蒸馏水清洗外植体2-3次， 需随时晃动 。
⑵酒精消毒
75%酒精倒入装外植体的容器内， 消毒外植体5-60s， 时间长短视植物材料情况而定， 一般幼嫩材料和室内带菌培养材料消毒时间短， 老材料或室外材料消毒时间长 。 动作一定迅速， 需晃动， 然后将酒精倒去 。 整个时间计算以酒精倾倒开始至酒精倒出瓶外为止，
⑶升汞消毒
1%生汞倒入装外植体的容器内， 消毒外植体5-10min， 时间长短视情况而定 。 需晃动， 在最后3min静置， 升汞注满容器， 将已灼烧的镊子放入容器升汞内浸泡 。
10%次氯酸钠溶液倒入装外植体的容器内， 消毒外植体10-12min， 时间长短视情况而定 。
⑷蒸馏水清洗
用镊子将外植体取出， 放入另一无菌蒸馏水瓶中清洗， 反复清洗4次 。
4、材料的整理
用灼烧冷却的镊子和剪刀对外植体进行处理， 剥离外植体材料芽外部小叶片， 露出尖端生长点和2-3片叶原基部分， 将此部分剪下做培养材料 。 再用无菌蒸馏水清洗3-4次 。
5、接入培养基
培养基瓶放入工作台内， 将剥离的材料分别用消毒过的镊子放入培养瓶内， 盖上瓶盖， 置培养篮内， 写上培养时间、操作人及培养品名， 入培养室培养 。
6、整理工作
清洁整理超净工作台和实验室 。
（五）实践指导
1、操作中严格有菌观念、无菌操作 。
2、操作前一定先换上工作服、专用鞋、清洁双手 。
3、超净工作台工作前， 检查工作台是否开启紫外灯和风机， 酒精灯、消毒器械的酒精、消毒液是否准备齐备 。 蒸馏水、培养基是否齐备 。
4、工作时培养基、蒸馏水、消毒液等放置齐整， 器械取出后放入消毒液里， 用过的溶液、线和报纸放在工作台外 。
5、接种工具不能碰触瓶口和工作台其它部位， 手不能碰触瓶口， 更不能伸入瓶内， 不能碰触材料 。 【植物组织培养过程】
6、无菌水和酒精、升汞处理材料时需不断晃动， 便于材料与液体充分接触 。
7、酒精、升汞处理材料时间必须适宜， 时间短消毒效果不理想， 时间长会将材料杀死 。
8、操作细致， 水不要洒在工作台上， 掉落在台面的材料不能再用 。
9、操作完毕， 须在瓶上注明日期、操作人， 便于观察 。
10、有些同学器械放置很乱， 整个超净工作台面乱七八糟， 影响效果 。
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