讨论与小结
紫萁孢子无菌培养途径孢子囊萌发率高, 质地均一, 生长势良好, 没有病害坏死等不良症状, 但存在成本高、耗费人工、炼苗时间较长导致成活率下降等缺点.无菌培养技术, 目前还处在摸索阶段, 不能将被子植物组织培养技术直接照搬.被子植物从外植体到成苗移栽一般只需帅天左右, 紫萁属较低等的蕨类植物, 有其独特的生活史, 自然条件下从孢子成熟到萌发成孢子体需四个月左右, 到基本上能移栽到大田栽培则共需要约六个月.目前的无菌培养技术和温室基质育苗都很难显著缩短其生活周期, 只能作为补充自然生态环境下资源不足的人工繁殖手段.
孢子粉的消毒效果比孢子叶小叶效果差, 不仅污染率高, 而且容易褐化死亡, 继续培养无孢子萌发.孢子叶小叶整体表面消毒比孢子粉消毒要理想的多.激素浓度高低对孢子萌发无显著影响, 不加任何激素与附加低浓度激素(低于1.0mg/l), 同样有很高的孢子萌发率, 但浓度太高(2.0~5.0mg/l)会抑制孢子萌发.无机盐浓度对孢子萌发影响较大, 较低的无机盐浓度促进孢子萌发, 将ms培养基中无机盐浓度减半是合适的.
糖浓度对孢子萌发影响较大, 在2%~3%范围内较合适, 低于2%和高出4%, 孢子萌发率明显降低.以食用白砂糖代替化学纯蔗糖, 对孢子萌发率基本上无影响.
温度对原叶体增殖影响较大, 25"c左右是原叶体增值的适宜温度, 低于20"c或昼夜有温差波动都对原叶体增殖有抑制作用.无机盐浓度对原叶体增殖无明显影响, ms和1/2ms培养基均适合原叶体增殖生长.培养基中附加少量活性炭和kh2p04对原叶体增殖和生长有促进作用.
6-ba和naa在较低浓度时, 对原叶体增殖效果较好, 当浓度高于2.0mg/l时反而对原叶体生长不利, 出现白化苗现象;2,4.d对原叶体增殖效果较好, 但片状体皱褶严重, 不舒展饱满:高浓度的kt有利于原叶体的增殖和生长.6-ba0.5mg/l+naa0.5mg/l、6-bal.0mg/l+naa0.5mg/l、naa0.5mg, l+kt5.0mg/l和naal.0mg/l+都能促进原叶体增殖, 并能生长良好, 具体哪一种促进原叶体增殖效果最好, 还有待进一步深入研究.6-ba0.5mg/l+naal.0mg/l分化出假根的能力最强, 可用于孢子体生根培养基.
此外, 培养基的质地对原叶体的快速增殖也影响较大.表面有水渍, 质地膨松, 轻敲有晃动感, 挖去一小块即有明水填充的培养基, 原叶体增殖比质地坚硬的培养基要明显加快, 长出孢子体的时间要早10d左右, 且生长状况良好.
原叶体增殖培养是紫萁孢子萌发途径中最重要的一个环节, 只有原叶体生长状况良好, 积累足够的养分, 在外界条件合适的情况下, 才能完成受精产生孢子体.如何缩短原叶体增殖周期, 尽量节约成本, 提前出苗, 将是紫萁孢子萌发培养中的重要议题.
【【花卉大全】紫萁组织培养的探讨二】
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