血浆如何提取,从全血提取血浆方法( 二 )
三、不同检测目标的实验选择什么类型的样本?
从核酸检测的角度讲, 人的基因组更多的存在于白细胞中, 而只有少量游离核酸存在于血清、血浆中, 如果白细胞大量凋亡, 血清血浆中的游离核酸量会有所增加 。 如果机体患有恶性肿瘤, 肿瘤组织坏死, 坏死的肿瘤细胞释放出核酸片段或肿瘤细胞发生血液转移, 血浆血清中的核酸量也会增加 。 因而, 如果是检测部分目标基因, 如筛查地中海贫血症, 筛查色盲基因等, 应该以全血作为实验样本, 因为血清和血浆中所含有的人的核酸数量远远少于全血, 检测灵敏度会降低很多 。 如果要检测肿瘤相关基因, 则要选择血浆或血清样本 。 如果以病原体核酸为检验目标, 如检测乙肝感染情况, 检测感冒病毒, 检测有无败血症等, 则以血清或血浆为实验样本, 这会天然地剔除血细胞这种杂质, 明显降低核酸提取过程中的难度, 有利于提高核酸纯度, 增加检测反应灵敏性和稳定性 。 血清和血浆相比, 一方面血清中含有更少的纤维蛋白原, 另一方面血清中的DNA是循环DNA, 主要来源于病变组织, 所以使用血清作为实验样本, 可以更进一步提高样本纯净度, 减少蛋白杂质, 提高游离核酸的浓度, 获得更为灵敏的检测结果 。
血清是怎么提炼出来的 血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分, 其主要区别是血清不含凝血因子和血小板, 血浆则含有凝血因子, 它们的制备方法如下:
1、血清的制备:获得的血液不能抗凝, 盛于离心管或可以离心的器皿中, 静置或置37℃环境中促其凝固, 待血液凝固后, 将其平衡后离心(一般为3000rpm, 离心 5~10min), 得到的上清液即为血清, 可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分), 分装备用 。
2、血浆制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液 = 1:9, 将血液加到一定量后颠倒混匀, 离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆 。 初用者最好将上清移至另一清洁容器, 吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸, 切忌不能吸起细胞成分 。
3、富含血小板血浆制备:将获得的血液经800rpm, 离心5min, 其上清即为富含血小板血浆 。
扩展资料:
鉴别方法
1、血清
血液凝固析出的淡黄色透明液体 。 如将血液自血管内抽出, 放入试管中, 不加抗凝剂, 则凝血反应被激活, 血液迅速凝固, 形成胶冻 。 凝血块收缩, 其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清, 也可于凝血后经离心取得 。 在凝血过程中, 纤维蛋白原转变成纤维蛋白块, 所以血清中无纤维蛋白原, 这一点是与血浆最大的区别 。
而在凝血反应中, 血小板释放出许多物质, 各凝血因子也都发生了变化 。 这些成分都留在血清中并继续发生变化, 如凝血酶原变成凝血酶, 并随血清存放时间逐渐减少以至消失 。 这些也都是与血浆区别之处 。 但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同 。 为避免抗凝剂的干扰, 血液中许多化学成分的分析, 都以血清为样品 。
2、血浆
血浆是血液的液体成分, 血细胞悬浊于其中 。 人体含有2750-3300毫升血浆, 约占血液总体积的55% 。 血浆的绝大部分是水(体积的90%), 其中溶解的物质主要是血浆蛋白, 还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳 。 血浆的主要功能是运载血细胞, 同时也是运输分泌产物的主要媒介 。
将新鲜血液离心, 使血细胞沉降, 上层淡黄色清液即是血浆 。 血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子 。
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