甘油培养花粉( 二 )


下面是植物组培的一般培养基配制:
配制培养基的具体操作
①根据配方要求 , 用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量 , 放入同一烧杯中 , 并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用 。
②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升 , 加热并不断搅拌 , 直至煮沸溶解呈透明状 , 再停止加热 。
③将①中所取的各种物质(包括蔗糖) , 加入煮好的琼脂中 , 再加水至1000毫升 , 搅拌均匀 , 配成培养基 。
【甘油培养花粉】④用1N的氢氧化钠或盐酸 , 滴入③中的培养基里 , 每次只滴几滴 , 滴后搅拌均匀 , 并用pH试纸测其pH值 , 直到将培养基的pH值调到5.8 。
⑤将配好的培养基 , 用漏斗分装到三角瓶(或试管)中 , 并用棉塞塞紧瓶口 , 瓶壁写上号码 。 瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5 。
培养基的成分比较复杂 , 为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉 , 可以准备一份配制培养基的成分单 , 将培养基的全部成分和用量填写清楚 。 配制时 , 按表列内容顺序 , 按项按量称取 , 就不会出现差错 。 成分单的格式与内容见表9-2 。
3.培养基的灭菌与保存
培养基配制完毕后 , 应立即灭菌 。 培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内 , 在汽相120℃条件下 , 灭菌20分钟 。 如果没有高压蒸汽灭菌锅 , 也可采用间歇灭菌法进行灭菌 , 即将培养基煮沸10分钟 , 24小时后再煮沸20分钟 , 如此连续灭菌三次 , 即可达到完全灭菌的目的 。
经过灭菌的培养基应置于10℃下保存 , 特别是含有生长调节物质的培养基 , 在4~5℃低温下保存要更好些 。 含吲哚乙酸或赤霉素的培养基 , 要在配制后的一周内使用完 , 其它培养基最多也不应超过一个月 。 在多数情况下 , 应在消毒后两周内用完 。
5.花药离体培养和花粉立体培养的区别是什么花药(anther)是花丝顶端膨大呈囊状的部分 , 是雄蕊的重要组成部分.花粉囊是产生花粉的地方.每一花药通常由4个或2个花粉囊(pollen sac)组成 ,  也就是说花药里面有很多花粉 , 所以花药培养出来是黏连在一起的很多小单倍体 花药离体培养: 离体培养花粉处于单核时期(小孢子)的花药.通过培养使它离开正常的发育途径(即形成成熟花粉最后产生精子的途径)而分化成为单倍体植株. 孩弧粉旧莠搅疯些弗氓花粉离体培养: 方法:选择亲本→有性杂交→F1产生的花粉离体培养获得单倍体植株→诱导染色体加倍获得可育纯合子→选择所需要的类型 。

甘油培养花粉

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