培养基如何养花( 二 )


对微量成分FeSO4?7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入,方法是先在1000mL中加入1g的FeSO4?7H2O,配成浓度为0.01g/mL的贮备液,再在1000mL培养基中加入以上贮备液1mL即可 。 待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积 。
如要配制固体培养基,其琼脂溶解过程同牛肉膏蛋白胨培养基配制 。 2.pH调节、分装、包扎及无菌检查 同牛肉膏蛋白胨培养基配制 。
(三)马丁氏培养基的配制马丁氏培养基是用于分离真菌的选择培养基 。 其配方如下:K2HPO4 1g,MgSO4?7H2O 0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖l0g,琼脂15~20g,水1000mL,自然pH 。
1.称量和溶解 先计算后称量,按用量称取各成分,并将其溶解在少于所需的水中 。 待各成分完全溶解后,补充水分到所需体积 。
再将孟加拉红配成1%的水溶液,在1000mL培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3mL,混匀后,加入琼脂加热融化,方法同牛肉膏蛋白胨培养基配制 。 2.分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白膝培养基配制 。
3.链霉素的加入 链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基融化后待温度降至45℃左右时才能加入 。 可先将链霉素配成1%的溶液(配好的链霉素溶液保存于-20℃),在100mL培养基中加1%链霉素0.3mL ,使每毫升培养基中合链霉素30μg 。
四、注意事项 称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖 。 调pH时要小心操作,避免回调 。
不同培养基各有配制特点,要注意具体操作 。 五、实验报告记录本实验配制培养基的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点 。
六、问题和思考l.配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?2.培养基配制完成后 。
2.花卉快速繁殖培养基一般包括基础成分.培养基的配制:对于经常使用的培养基,可先将各种药品配成10倍或100倍的母液,放入2~4℃的冰箱中保存,用时再按比例稀释 。
(1)母液的配制:
①大量元素母液.配成10倍液 。 用感量0.01克天平称取大量元素,分别溶解后按顺次混合,加蒸馏水使其总量达1升,即为大量元素的母液 。 配培养基时,每配1升取母液100毫升 。
②微量元素母液:因用量小,常配成100倍或1000倍母液,即将每种化合物的量加大100倍或1000倍 。 逐次溶解并混在一起 。 在配制1升培养基时,取母液10毫升或1毫升 。 为了配制不同培养基时使用方便,也可将维生素类物质分别配制 。 配制时用感量0.001克的天平称取 。
③铁盐母液:铁盐是单独配制的,用感量0.01克天平称取,分别溶解、混合加水定容至500毫升 。 每升培养基取此液5毫升 。
④维生素母液:用感量0.001克的天平称量,分别用容量瓶配成所需的浓度(0.1~10毫克/升),用时按培养基配方中要求的量分别加入 。
⑤植物激素的配制:单个称量,分别贮藏,一般配成0.1~0.5毫克/毫升的溶液 。 由于多数激素难溶于水,可采
用以下方法配制 。 IAA(叫噪乙酸):先溶于少量95%酒精中,再加水至一定浓度 。 NAA(蔡乙酸):可溶于热水中,也可用少量95%酒精溶解,再加水至一定浓度 。 2,4一D:不溶于水中,可用lmol/L的NaOH溶解后,再加水至一定浓度 。 犷KT(6一吠喃氨基嗓吟)及BA(6一苇基嗦岭):先溶于少量的Imol/L盐酸中,再加水至一定浓度 。 激素的用量,一般采用ppm及mol/L表示 。
(2)培养基的配制:
①根据采用培养基配方的要求,从母液中取出(用量筒或移液管)所需要的大量元素、微量元素、铁盐、维生素及
植物激素等,放于烧杯中,加蒸馏水补足1000毫升 。
②把琼脂放入少量水中,加热使其溶化后,加入①中,并不断搅动使其混合均匀 。

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